蛍光試薬とLED励起波長・蛍光波長・フィルターワークのガイドテーブル



 蛍光試薬・励起波長 蛍光波長 光源 フィルターワーク 一覧表
*記載内容に間違い等が有りましたら、ぜひお知らせください。   
お問い合わせの多い試薬の一覧表です。「分光特性・解説」から、蛍光励起分光特性表と、フィルターワークのガイドラインの解説へジャンプします。

試薬名 励起
波長
蛍光
波長
詳細図 試薬名 励起
波長
蛍光
波長
詳細図
EX nm EX
(Sub)
EM nm EX nm EX
(Sub)
EM nm
Alexa Fluor 532 532 554 GFP 488 507
Cy3 550 570 mCherry 580 610
DsRed 557 579 SYBR Gold 495 540
EtBr 300 518 605 SYBR Green I 498 522
FITC 490 525 SYPRO Red 550 300 630
Gel Green 250 500 530 SYPRO Ruby 280 450 620
Gel Red 270 510 600 TagRFP 555 583


*この他の蛍光試薬・励起波長/蛍光波長一覧表はこちら → 試薬 全376種


解説はあくまでもガイドラインです。 光源照度や染色の程度、フィルターの性能、カメラの特性等により、結果は一定ではなく、必ず確認できるとお約束するものではありません。実際につきましてはデモ機にてご確認いただけますようお願いします。



注: バックグラウンドをカットするロングカットフィルターが必要な場合が有ります。→ < ◎ * >
■ AlexaFluor532®

AlexaFluor532 Spectrum 励起蛍光波長 分光特性 


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます
蛍光顕微鏡や細胞生物学における細胞等の組織のラベルとして使用される。蛍光基に直結したスルホン酸基を有することが特徴、特にローダミンの誘導体は明るく、光安定性が高い試薬。
販売 Lefe Technology

励起波長と蛍光波長が近く、分離が簡単ではありません。青緑505nmLEDとSC-56の組み合わせが有効ですが、透過光源の場合、バックグラウンドを完全除去には、長波長側のすそ野をカットできるフィルターが必要です。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ Cy3®

Cy3 Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます
免疫細胞化学の用途に加えて、RNAの所在などの研究のため核酸を標識するために使用されるシアニン型の蛍光標識試薬。
販売 Mirus Bio LLC

AlexzFlouor532と同じように、励起波長と蛍光波長が近く、分離が難しい。青緑505nmLEDとSC-56の組み合わせが有効。透過光源の場合、バックグラウンドを完全になくすために、長波長側のすそ野をカットできるフィルターが必要です。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ DsRed-Express2®

DsRed Express2 Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

毒性の少ないバクテリアル発現ベクター。
販売 Clontech Laboratories, Inc.

励起と蛍光のピーク波長は近いが、波長に幅が有り、分離しやすい。青・青緑・緑とも励起でき、分離も赤色フィルターも有効と思われる。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ Ethidium Bromide (エチジウム・ブロマイド)

EtBr Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

ゲル中の核酸バンドを染色する、従来からもっとも多用させている蛍光試薬。 試薬に毒性が有るため、、取り扱いに注意が必要。
Wikipedia →

励起のピークは300nmの他に、518nmにも有り、505nmや530nmのLEDで励起が可能です。但し、効率は低いので、強力な光源と、バックグラウンドを除去する高性能なフィルターが必要になります。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×
バックグラウンドを完全除去
 Dichroic Filterの効果

不使用時     使用時
*当社の青緑色LEDトランスイルミネーターは、高性能複合ダイクロイックフィルターを採用しています。

お勧め機種 <LED505-TR60W>


■ FITC

FITC Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます
顕微鏡観察に用いられる蛍光色素の一種。法医学や血清学における血痕の探索、色素追跡用途などに広く利用される。
販売 Kirkegaard & Perry Laboratories


励起波長は、490nmで、505nmのLEDで励起が可能ですが、蛍光波長が近いので、分離が簡単ではありません。バックグラウンドを除去する高性能フィルターが必要になりそうです。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm ×
505nm  ○ *
530nm × ×


■ Gel Green®

Gel Green Spectrum 励起蛍光波長 分光特性

★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

ゲル中の核酸バンドを染色する製品を開発。従来品のエチジウムブロミド(EtBr)と比べて環境にやさしく安全性にも優れ、常温保存が可能であるなど操作性においても優れて。プレステイン染色・ポストステイン染色双方とも可能。特にエチブロで検出できない低分子量の核酸バンドも、検出することができる。
販売 cBiotium


FITCとほぼ同じような波長特性の試薬です。光源波長とフィルターワークもほぼ同じと考えられる。
励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm ×
505nm  ○ *
530nm × ×


■ Gel Red®

Gel Red Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

ゲル中の核酸バンドを染色する製品を開発。従来品のエチジウムブロミド(EtBr)と比べて環境にやさしく安全性にも優れ、常温保存が可能であるなど操作性においても優れて。プレステイン染色・ポストステイン染色双方とも可能。特にエチブロで検出できない低分子量の核酸バンドも、検出することができる。

販売 cBiotium


前述のエチブロ(Ethidium Bromide)と非常に似た特性です。 エチブロよりは、520nm辺りでエチブロより高い吸収が認められますので、LED光源がより有効です。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ GFP / EGFP

GFP EGFP Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

GFPはリアルタイム、かつ、細胞破壊の必要がなく出でき、他のタンパク質との融合タンパク質としても機能を発揮する(GFPタグ)。特に細胞内のシグナル伝達などに関与するタンパク質の細胞内局在を明らかにするツールとして、広く使用される。
販売 GE healthcare


励起と蛍光波長のピークが非常に近いが、励起波長が短波長側に多少広がっている為、青色LEDがもっとも有効と考えられます。


励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm ×
505nm  ○* ×
530nm × ×


■ mCherry®

mCherry Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

サンゴ(Discosoma sp.)由来のRFP(DsRed)を改変した赤色蛍光タンパク質です。目的タンパク質との融合発現やプロモーター活性のモニタリング、バクテリアでの発現などに利用可能、蛍光を発するまでの時間が速く,安定で退色しにくいという特性があります。
販売 Clontech Laboratories, Inc


励起波長のピークは蛍光にに近いが、短波長側にも広がりが有るので、青緑LEDや緑色LEDが有効。緑色LEDで励起し、赤色フィルターで分離するのが効果的。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ○ *
530nm ×


■ TagRFP


RFP Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

イソギンチャクEntacmaea quadricolor由来のRFPタンパク質。これまでのモノマー型の赤色蛍光タンパク質で最も高い蛍光輝度を示します。TagRFPは哺乳類細胞で発現させた場合、トランスフェクションの10-12時間後に蛍光シグナル検出可能。
販売 Evrogen JSC


青緑と特に緑色LEDで励起効率が高い試薬です。緑色LEDの場合、蛍光波長が近い為、SC-56ではバックグラウンドが多くなりますが、蛍光の長波長側のすそ野が広いので、SC-60であれば分離することが出来そうです。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ SYBR Gold®

SYBR Gold Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます


販売 Life Technology


青色や青緑色LEDで比較的容易に励起可能で、蛍光のピーク波長も差が有るため、蛍光の分離が容易な試薬と言えます。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ SYBR Green®

SYBR Green Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

分子生物学で核酸の染色に用いられる非対称のシアニン系色素。二重らせんを組んでいるDNAと特異的に結合する。発癌性のエチブロ代替物質とすることができる。但し、DNA結合能があるので無害というわけではない。
販売 Life Technology


励起波長は、SYBR Goldに近い励起波長ですが、蛍光波長が近い為、少し分離が難しくなります。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm × ×


■ SYPRO Orange®

SYPRO Orange Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタを表の上に移動すると、LEDとフィルターの分光特性が表示されます。

この試薬はタンパク質の種類による蛍光強度の差があまりなく、長時間安定した発色を示すので取扱いが容易です。染色後のゲル洗浄操作もバックグラウンドが低いため短時間で処理でき、ゲル電気泳動に適した蛍光法です。染色後ウェスダンプロッティンクし、免疫試薬による検出も可能となります。
販売 GE healthcare


励起波長のすそ野が広く、青色LEDも青緑LEDもほぼ全て有効に吸収されます。蛍光波長にも差が有るため、蛍光の分離が比較的容易と考えられます。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ SYPRO Red®

SYPRO Red Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

蛍光顕微鏡や細胞生物学における細胞等の組織のラベルとして使用される。蛍光基に直結したスルホン酸基を有することが特徴、特にローダミンの誘導体は明るく、光安定性が高い試薬。
販売 GE healthcare


やはり励起波長のすそ野が広い試薬で、青緑と緑色LEDが励起に有効です。SC-56もSC-60も蛍光の大部分を透過できるので、分離もし易いと思われます。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


■ SYPRO Ruby®

SYPRO Ruby Spectrum 励起蛍光波長 分光特性


★ ポインタをこの表に移動すると、LEDとフィルターの波長が表示されます

蛍光顕微鏡や細胞生物学における細胞等の組織のラベルとして使用される。蛍光基に直結したスルホン酸基を有することが特徴、特にローダミンの誘導体は明るく、光安定性が高い試薬。
販売 GE healthcare


励起波長と蛍光波長のピークが離れていて、蛍光の分離が大変容易な試薬と言えます。青色LEDが最も効率がよく、青緑色も有効です。

励起波長 試薬励
起効率
組合せ総合評価
SC-56 SC-60
470nm
505nm  ◎ *
530nm ×


注: バックグラウンドをカットするロングカットフィルターが必要な場合が有ります。→ < ◎ * >


*この他の蛍光試薬・励起波長/蛍光波長一覧表はこちら → 試薬 全376種


解説はあくまでもガイドラインです。 光源度照度や染色の程度、フィルターの性能、カメラの特性等により、結果は必ずしも一定ではなく、必ず確認できるとお約束するものではありません。実際につきましてはデモ機にてご確認いただけますようお願いします。